Gen otpornosti na karbapenem (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Naziv proizvoda
HWTS-OT045 Komplet za detekciju gena otpornosti na karbapenem (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (fluorescentna PCR)
Epidemiologija
Karbapenemi antibiotici su atipični β-laktamski antibiotici sa najširim antibakterijskim spektrom i najjačim antibakterijskim djelovanjem. Zbog svoje stabilnosti na β-laktamaze i niske toksičnosti, postao je jedan od najvažnijih antibakterijskih lijekova za liječenje teških bakterijskih infekcija. Karbapenemi su visoko stabilni na plazmidom posredovane β-laktamaze proširenog spektra (ESBL), hromozome i plazmidom posredovane cefalosporinaze (AmpC enzimi).
Kanal
| PCR-mješavina 1 | PCR-mješavina 2 | |
| FAM | IMP | VIM |
| VIC/HEX | Interna kontrola | Interna kontrola |
| CY5 | NDM | KPK |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
Tehnički parametri
| Skladištenje | ≤-18℃ |
| Rok trajanja | 12 mjeseci |
| Vrsta uzorka | Sputum, čiste kolonije, rektalni bris |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5,0% |
| LoD | 103CFU/mL |
| Specifičnost | a) Komplet detektuje standardizovane negativne reference kompanije, a rezultati ispunjavaju zahtjeve odgovarajućih referenci. b) Rezultati testa unakrsne reaktivnosti pokazuju da ovaj komplet nema unakrsne reakcije s drugim respiratornim patogenima, kao što su Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilus influenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, respiratorni adenovirus, Enterococcus ili uzorci koji sadrže druge gene otporne na lijekove CTX, mecA, SME, SHV, TEM, itd. c) Anti-interferencija: Mucin, Minociklin, Gentamicin, Klindamicin, Imipenem, Cefoperazon, Meropenem, Ciprofloksacin hidrohlorid, Levofloksacin, Klavulanska kiselina, Roksitromicin su odabrani za test interferencije, a rezultati pokazuju da gore navedene interferirajuće supstance nemaju interferirajuću reakciju na detekciju gena otpornosti na karbapenem KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM i IMP. |
| Primjenjivi instrumenti | Applied Biosystems 7500 sistemi za PCR u realnom vremenu QuantStudio®5 PCR sistemi u realnom vremenu SLAN-96P PCR sistemi u realnom vremenu (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) LightCycler®480 sistem za PCR u realnom vremenu LineGene 9600 Plus sistem za detekciju PCR-a u realnom vremenu (FQD-96A，HangzhouBioer tehnologija) MA-6000 Kvantitativni termalni cikler u realnom vremenu (Suzhou Molarray Co., Ltd.) BioRad CFX96 sistem za PCR u realnom vremenu BioRad CFX Opus 96 sistem za PCR u realnom vremenu |
Tok rada
Opcija 1.
Preporučeni reagens za ekstrakciju: Macro & Micro-Test General DNA/RNA Kit (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (koji se može koristiti s Macro & Micro-Test automatskim ekstraktorom nukleinskih kiselina (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) proizvođača Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.. Dodajte 200 μL fiziološke otopine u talog talusa. Naknadni koraci trebaju slijediti upute za ekstrakciju, a preporučeni volumen eluacije je100μL.
Opcija 2.
Preporučeni reagens za ekstrakciju: Reagens za ekstrakciju ili pročišćavanje nukleinskih kiselina (YDP302) proizvođača Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. Ekstrakciju treba započeti u strogom skladu s korakom 2 uputstva za upotrebu (dodati 200 μL pufera GA u talog talusa i protresti dok se talus potpuno ne suspenduje). Za eluciju koristite vodu bez RNaze/DNaze, a preporučeni volumen eluacije je 100 μL.
Opcija 3.
Preporučeni reagens za ekstrakciju: Reagens za oslobađanje uzorka za makro i mikro test. Uzorak sputuma treba isprati dodavanjem 1 mL fiziološke otopine u gore spomenuti tretirani talog talusa, centrifugirati pri 13000 o/min tokom 5 minuta, a supernatant odbaciti (sačuvati 10-20 µL supernatanta). Za čistu koloniju i rektalni bris, dodati 50 μL reagensa za oslobađanje uzorka direktno u gore spomenuti tretirani talog talusa, a sljedeće korake treba ekstrahirati prema uputstvu za upotrebu.
